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產(chǎn)品分類TECHNICAL ARTICLES
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產(chǎn)品貨號:PC0020產(chǎn)品名稱:BCA蛋白濃度測定試劑盒產(chǎn)品規(guī)格:50T/10*50T產(chǎn)品簡介:BCA Protein Assay Kit索萊寶 BCA蛋白濃度測定試劑盒-常備現(xiàn)貨
聯(lián)系電話:13269192326
品牌 | SOLARBIO/索萊寶 | 貨號 | PC0020 |
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規(guī)格 | 50T/10*50T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | BCA蛋白濃度測定試劑盒 |
Solarbio/索萊寶 PC0020 BCA蛋白濃度測定試劑盒
索萊寶 BCA蛋白濃度測定試劑盒-常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品貨號:PC0020
產(chǎn)品名稱:BCA蛋白濃度測定試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T/10*50T
產(chǎn)品簡介:
BCA Protein Assay Kit
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準
規(guī)格:50T(500微孔) ; 10*50T(500微孔)
儲存條件:BSA附件-20℃,其它試劑RT,有效期1年
堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫藍色的絡(luò)合物,測定其在562nm處的吸收值,并與標準曲線對比,即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測結(jié)果,但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實驗中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
一. 微孔酶標儀法
1. 配制工作液:根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標準品:取10μL BSA標準品用PBS稀釋至100μL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。將標準品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標準品孔中,加PBS補足至20μL。
3. 將樣品作適當稀釋(最好多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時誤差偏大,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分鐘。用酶標儀測定A562nm,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時,應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。
二. 分光光度計法 如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下:
1. 配制工作液: 根據(jù)標準品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時可能會有渾濁,但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標準品:取100μL BSA標準品用PBS稀釋至1mL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支(或者更多)5mL離心管,標上號,按下表加入試劑。
離心管號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7(樣品管1) | 8(樣品管2) | 9(樣品管3) |
標準蛋白BSA | 0 | 40μL | 80μL | 120μL | 160μL | 200μL | 200μL適當稀釋的樣品1 | 200μL適當稀釋的樣品2 | …… |
PBS | 200μL | 160μL | 120μL | 80μL | 40μL | 0 | 0 | 0 | 0 |
BCA工作液 | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml | 2ml |
4.37℃放置15-30分鐘。用分光光度計測562nm處吸光值,根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。
注意事項:
1. 長期不用時,Cu試劑與PBS稀釋液可置于2-8℃保存,如發(fā)現(xiàn)細菌污染則應(yīng)丟棄。BCA試劑在低溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時,可37℃溫育使其wan全溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時,請采用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
索萊寶 BCA蛋白濃度測定試劑盒-常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品訂購信息:
PC0020 BCA蛋白濃度測定試劑盒 50T/10*50T
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傳真:86-010-62817090
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