品牌 AAT Bioquest 貨號 21180 規(guī)格 1000 Tests 供貨周期 現貨 主要用途 Cell Meter™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),制藥
AAT Bioquest 21180 Cell Meter ™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒
我們北京云肽生物科技有限公司作為AAT Bioquest 公司的特約經銷商為客戶提供，正規(guī)進口，保證原裝正品，貨期穩(wěn)定，折扣好的服務標準。
AAT Bioquest 熒光細胞內pH測定試劑盒
美國AAT Bioquest Inc.( 前身是ABD Bioquest ，Inc.) 是一家為從事生命科學研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學家研發(fā)、生產和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學檢測領域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術。AAT Bioquest 的產品幫助 quan 世 jie 的科學家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學，免疫學，細胞生物學和分子生物學等領域。AAT Bioquest 會不斷介紹新產品，快速的豐富各個領域的產品。
AAT Bioquest 21180 Cell Meter ™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 1000 Tests
產品品牌：AAT Bioquest
產品貨號：21180
產品名稱：Cell Meter ™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒
產品規(guī)格：1000 Tests
AAT Bioquest 熒光細胞內pH測定試劑盒
AAT Bioquest 21180 Cell Meter ™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 1000 Tests
細胞內pH 值變化與多種生理和病理過程有關，包括細胞增殖，細胞凋亡，受精，惡性腫瘤，多藥耐藥性，離子轉運，溶酶體貯積癥和阿爾茨海默病。細胞計™熒光法細胞內pH 測定試劑盒利用AAT Bioquest 專有的熒光指示劑來測量細胞內pH 值的相對變化。它是一種均質的動力學活細胞熒光測定，采用標準程序或酸負荷程序。標準方案設計用于測量感興趣的治療靶點，治療時細胞內pH 值降低?！八嶝摵?程序旨在測量與GPCR 活化或生長因子活性引起的細胞代謝變化相關的細胞內pH 值的增加。通過“酸負荷"程序，在熒光pH 染料以最小體積加載到細胞中后，加入氯化銨溶液。該“酸加載"步驟之后在相對大體積（~4X ）的緩沖液中添加激動劑。突然的體積變化引發(fā)細胞中的氨（NH3 ）外排，導致細胞內pH 值迅速降低，從而降低熒光信號。激動劑對細胞內pH 后續(xù)恢復的影響通過相對熒光信號增加來測量。
平臺
熒光酶標儀
Excitation ：490 納米
Emission ：535 納米
Cutoff ：515 納米
推薦板：黑色墻壁/ 透明底部
組件
組件A ：RatioWorks ™ BCFL ，AM 1 瓶
組件B ：10X Pluronic F127 Plus 1 瓶 （10 mL ）
組分C ：HHBS （Hanks 緩沖液，含20 mM 肝素） 1 100 mL ）
組分 D ：50 mM 準備使用™probenecid 1 瓶 （10 mL ）
用于標準電池負載（單板）
1. 在生長培養(yǎng)基中制備細胞
2. 加入等體積的RatioWorks ™ BCFL ，AM 染料加工溶液
3. 在37 °C 孵育1 小時
4. 在Ex/Em= 490/535 nm （截止= 515 nm ）下讀取熒光，加入50 μL/ 孔化合物（或比率為500/530 nm 和440/530 nm ）
協議摘要
用于酸負荷（一個 96 孔板）
1. 在生長培養(yǎng)基中制備細胞
2. 去除生長培養(yǎng)基
3. 添加 RatioWorks ™ BCFL 、AM 染料工作溶液（50 μL/ 孔/96 孔板）
4. 在 37 °C 下孵育 1 小時
5. 添加 220 mM NH4 氯（5 μL/ 孔）
6. 在室溫下孵育 15 分鐘
7. 在Ex/Em= 490/535 nm （截止= 515 nm ）下讀取熒光，加入200 μL/ 孔化合物（或比率為500/530 nm 和440/530 nm ）
重要事項：在開始實驗之前，在室溫下解凍所有試劑盒組分。
儲備溶液的制備
除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20 °C 。避免反復凍融循環(huán)。
RatioWorks ™ BCFL ， AM 庫存解決方案
將 200 μL DMSO 加入 RatioWorks BCFL 、AM （組分 A ）的小瓶中，并充分混合以制成 RatioWorks ™™ BCFL 、AM 儲備溶液。
注意 20 μL 重構 RatioWorks ™ BCFL 、AM 儲備溶液足以用于 1 板標準細胞負載。10 μL 重構 RatioWorks ™ BCFL 、AM 儲備溶液足以用于 1 板酸負荷。RatioWorks ™ BCFL ，AM 儲備溶液可以儲存在≤-20oC 如果管子密封嚴密，則一個月。避光。
工作溶液的制備
1. 用于標準電池負載（單板）
1. 將 1 mL 的 10X Pluronic F127 Plus （組分 B ）加入 9 mL 的 HHBS （組分 C ）中，充分混合制成 1X 測定緩沖液。
注意對于需要丙磺shu 上樣的細胞（例如CHO 細胞），稀釋50 mM 準備以™ 1 至5 mM 的濃度使用丙磺shu （組分D ）（CHO 細胞 shou xuan 5 mM ）。
2. 將 20 μL 重構的 RatioWorks BCFL 、AM 儲備溶液加入 10 mL 的 1X 測定緩沖液中，充分混合，制成 RatioWorks ™™ BCFL 、AM 染料工作溶液。該RatioWorks ™ BCFL ，AM 染料工作溶液在室溫下可穩(wěn)定至少2 小時。
2. 用于酸負荷（一個 96 孔板）
1. 將 1 mL 的 10X Pluronic F127 Plus （組分 B ）加入 4 mL 的 HHBS （組分 C ）中，充分混合制成 1X 測定緩沖液。
注意對于需要丙磺shu 上樣的細胞（例如CHO 細胞），稀釋50 mM 準備以™ 0.5 至2.5mM 的濃度使用丙磺shu （組分D ）（CHO 細胞 shou xuan 2.5 mM ）。
2. 將 10 μL 重構的 RatioWorks BCFL 、AM 儲備溶液加入 5 mL 的 1X 測定緩沖液中，充分混合，制成 RatioWorks ™™ BCFL 、AM 染料工作溶液。該RatioWorks ™ BCFL ，AM 染料工作溶液在室溫下可穩(wěn)定至少2 小時。
實驗方案樣本
運行標準細胞載量pH 測定
1. 將 100 μL/ 孔（96 孔板）或 25 μL/ 孔（384 孔板）RatioWorks ™ BCFL 、AM 染料工作溶液添加到細胞板中。
注意 如果您的化合物干擾血清，請務 bi yong HHBS 緩沖液替換生長培養(yǎng)基（100 孔板為 96 μL/ 孔，染料上樣前為 25 孔板為 384 μL/ 孔）。
2. 將染料加載板在細胞培養(yǎng)箱中孵育30 分鐘，然后在室溫下再孵育板30 分鐘。
注意如果測定需要37 °C ，請立即進行實驗，無需進一步室溫孵育。
3. 使用 HHBS 或所需的緩沖液制備復合板。
4. 通過監(jiān)測Ex / Em = 490 / 535 nm （截止= 515 nm ）或500/530 nm 和440/530 nm （截止= 515 nm ）的熒光進行比率測量來運行pH 測定。化合物添加量為 50 μL/ 孔（96 孔板）或 25 μL/ 孔（384 孔板）。
注意 該測定應在化合物添加后 3 至 5 分鐘內完成，但建議在測定開發(fā)期間至少收集 8 分鐘的數據。
運行酸負荷的pH 測定
1. 從細胞板中取出生長培養(yǎng)基。
2. 將 50 μL/ 孔/96 孔板 RatioWorks ™ BCFL 、AM 染料工作溶液添加到細胞板中。
3. 將染料加載板在細胞培養(yǎng)箱中孵育30 分鐘，然后在室溫下再孵育板30 分鐘。注意：如果測定需要37 °C ，請立即進行實驗，無需進一步室溫孵育。
4. 加入 5 μL 220 mM NH4Cl 并將板離心 5 秒鐘。在室溫下孵育15 分鐘。
注意新罕 bu shen 爾州4Cl 溶液應在HHBS （組分C ）中新鮮制備。
5. 使用 HHBS 或所需的緩沖液制備復合板。
6. 通過監(jiān)測Ex / Em = 490 / 535 nm （截止= 515 nm ）或500/530 nm 和440/530 nm （截止= 515 nm ）的熒光進行比率測量來運行pH 測定。化合物添加量為 200 μL/ 孔/96 孔板。
注意 該測定應在化合物添加后 3 至 5 分鐘內完成，但建議在測定開發(fā)期間至少收集 8 分鐘的數據。
產品訂購信息：
21180 Cell Meter ™ 熒光細胞內 pH 測定試劑盒 1000 Tests
您的位置：
立即咨詢
聯系電話：13269192326
